产品货号：
GL1410
中文名称：
4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(pH8.8)
英文名称：
4×SDS-PAGE Separating Gel Buffer，pH8.8
产品规格：
100mL|500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品为配制SDS-PAGE分离胶的缓冲液，可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷，产品中已加入10% SDS，使用时不用另外加入。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
| 组分 | 100mL | 500mL |
| 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(pH8.8) | 100mL | 500mL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：室温，有效期1年。
30% Acr-Bis(29:1)、10% APS、TEMED、蒸馏水。
- 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存，应尽量减少室温存放时间以防失效，有效避免失效的方法是分成小份，-20℃保存，用2～3次，剩余的弃用，亦可4℃保存几天。
- TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖，另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
- 配制聚丙烯凝胶的过程中，如果室温较低，可以置于37℃放置，加速凝固。
- 30% Acr-Bis(29:1)有轻微神经毒性，请小心操作。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
以下操作步骤仅供用户参考。根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表1。
一、灌制分离胶
各试剂使用量请参考附表3
- 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
- 加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
- 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
- 加入10% APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
- 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1～2cm的水层，使凝胶表面保持平整。
- 静置30～60min，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
各试剂使用量请参考附表2
- 小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。
- 将30% Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混合。
- 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
- 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
- 将梳子插入凝胶内避免产生气泡，静置10～20min，等待浓缩胶聚合。
- 待凝胶聚合后小心地拔出梳子，以免破坏加样孔，进行常规电泳操作。
附表1．不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 | |
| 6%胶 | 50～150kD |
| 8%胶 | 30～90kD |
| 10%胶 | 20～80kD |
| 12%胶 | 12～60kD |
| 15%胶 | 10～40kD |
附表2．配制5% SDS-PAGE的浓缩胶
| 凝胶体积 | 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL) | ||||
| 蒸馏水 | 30% Acr-Bis(29:1) | 4×浓缩胶缓冲液 | 10% APS | TEMED | |
| 2mL | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.004 |
| 4mL | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.008 |
| 6mL | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.012 |
| 8mL | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.016 |
附表3．配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶 浓度 | 凝胶 体积 | 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL) | ||||
| 蒸馏水 | 30% Acr-Bis(29:1) | 4×分离胶缓冲液 | 10% APS | TEMED | ||
| 6% | 5mL | 2.75 | 1 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10mL | 5.5 | 2 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15mL | 8.25 | 3 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20mL | 11 | 4 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5mL | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10mL | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15mL | 7.25 | 4 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20mL | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5mL | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 6.25 | 5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5mL | 1.75 | 2 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 3.5 | 4 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 5.25 | 6 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 7 | 8 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5mL | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 2.5 | 5 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 5.0 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
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